Криоконсервация

Криоконсервация — это безопасный метод замораживания и сохранения половых клеток и эмбрионов в жидком азоте при температуре -196°С.
vrt-rostov.ru

Использование такой низкой температуры позволяет остановить все биохимические процессы в клетках и длительное время их хранить.

Резкий перепад температур в процессе замораживания изменяет агрегационные свойства вне- и внутриклеточной среды, нарушая структуру и функцию клеток. Дегидратация клеток сопровождается их сморщиванием, а образование снаружи и внутри кристаллов льда нарушает электролитный баланс и проницаемость клеточной мембраны.

Ледяные кристаллы вызывают повреждение внутриклеточных структур и гибель клеток. Поэтому перед замораживанием добавляют криопротекторные среды. Эти среды препятствуют сморщиванию клеток, влияя на обмен ионов, уменьшают образование кристаллов льда, а также связываются с клеточной мембраной, стабилизируя ее.

Криоконсервация женского и мужского биологического материала (ооциты/зиготы/бластоцисты, спермы/ биоптат, полученный из яичек мужчины) может проводиться по следующим причинам:

Сохранение женского и мужского биологического материала в медицинских целях для лечения различных форм бесплодия с применением вспомогательных репродуктивных технологий.

В случаях, когда получение спермы при проведении программы ВРТ невозможно в конкретный момент.
Для хранения женского и мужского биологического донорского материала.
Предстоящее лечение онкозаболевания (хирургическое лечение, лучевая или химиотерапия), когда существует риск утратить репродуктивную функцию.

Процесс хранения биологического материала не оказывает негативного влияния на его качество, однако для снижения возможных рисков и повышения шансов наступления здоровой беременности и рождения ребенка крайне важна правильная подготовка к программам ВРТ супружеской пары с целью получения качественного биологического материала мужчины и женщины.

Криоконсервация ооцитов/зигот/бластоцист может проводиться по желанию пациентов или по медицинским показаниям:

Сохранение избыточного биологического материала (ооциты/зиготы/ бластоцисты) высокого качества с возможностью использования его в последующих программах ВРТ. Избыточный биологический материал может быть заморожен на неопределенный период времени, сохраняя возможность проведения второй попытки в случае, если первая имплантация прошла неудачно или после успешной программы ВРТ, завершившейся родами, с целью последующей беременности. Сохранение качественного биологического материала (/ооциты/зиготы/бластоцисты) позволяет провести переносы эмбрионов в полость матки женщины без повторной гормональной симуляции яичников.
В программах «Донация ооцитов» для синхронизации менструальных циклов донора ооцитов и пациентки (женщины-реципиента), у которой невозможно получить ооциты нормального качества.
С целью снижения частоты возможных осложнений при угрозе развития синдрома гиперстимуляции яичников в программах ВРТ для последующего проведения отсроченного переноса эмбрионов в полость матки женщины.
При выявлении медицинских противопоказаний (ОРВИ, обострение хронических заболеваний и т.д.) или по семейным причинам, при которых перенос эмбрионов в полость матки женщины в лечебном цикле ВРТ невозможен. В этом случае перенос эмбрионов может быть отсрочен.

В 2000 году Доктор Масашиге Куваяма изобрел самый современный способ криоконсервации ооцитов и эмбрионов – метод витрификации на криотопах. С тех пор его метод использовался более 500000 раз по всему миру в более чем 1200 клиниках сорока стран с неизменно превосходными результатами.

Этот метод заморозки получил широкое распространение, ввиду высочайшей эффективности и простоты использования.

Внедрение метода витрификации в эмбриологическую практику позволило повысить выживаемость ооцитов и эмбрионов человека при криоконсервации до 98%.

В составе эмбриологической лаборатории ЦЕНТРА РЕПРОДУКЦИИ ЧЕЛОВЕКА И ЭКО находится криохранилище, в котором расположены сосуды Дьюара с жидким азотом. В этих сосудах хранятся в замороженном (криоконсервированном) виде сперма/ биоптат, полученный из яичек мужчины ооциты/зиготы бластоцисты (пациентов и доноров). Витрификация ооцитов, эмбрионов, спермы проводится с использованием сред Kitazato (Япония) методом криотоп. Медленная заморозка проводится с использованием программного замораживателя «Consarctic» (Германия).

Ооциты и эмбрионы хранятся на носителе-криотопе, на котором указывают ФИО пациентки, дата заморозки и количество эмбрионов (ооцитов). Криотопы помещают в специальные ячейки, промаркированные аналогичным образом.

Все данные о пациенте и его биологическом материале вносятся в журнал криоконсервации и эмбриопротокол, с учетом сохранения персональных данных.

Дети, рожденные в результате беременности с использованием размороженных эмбрионов, ничем не отличаются от других. Это подтверждено огромным числом малышей, появившихся на свет в результате «крио-беременностей».
vrt-rostov.ru

Криоконсервация спермы

После разжижения, эякулят анализируют в соответствии с рекомендациями ВОЗ, оценивая подвижность и концентрацию сперматозоидов, их морфологию. Затем тщательно смешивают с равным объемом криопротекторной среды. Разведенную пробу переносят в стерильные подписанные пробирки и постепенно охлаждают. Слишком быстрое охлаждение сопровождается сморщиванием клеток вследствие их дегидратации, а слишком медленное - образованием ледяных кристаллов. После охлаждения пробы хранят при -196 С в жидком азоте в сосудах Дьюара. Замороженные пробы можно длительно хранить, в течение нескольких лет.

Сперма замораживается в специальных криовиалах, на которых указывают ФИО пациента, дату заморозки и помещают в держатель, имеющий свой идентификационный номер.

Все данные о пациенте и его биологическом материале вносятся в журнал криоконсервации, с учетом сохранения персональных данных.